2016中國(guó)體外診斷試劑創(chuàng)新論壇，聚焦液態(tài)活檢市場(chǎng)
【中國(guó)化工儀器網(wǎng) 】導(dǎo)讀：液體活檢是近年來(lái)生物醫(yī)學(xué)行業(yè)非常熱門的領(lǐng)域之一。與標(biāo)準(zhǔn)的組織活檢相比，液體活檢具有一些理論優(yōu)勢(shì)：創(chuàng)傷小、可重復(fù)性、實(shí)時(shí)判斷療效、動(dòng)態(tài)調(diào)整治療決策等。去年，這一技術(shù)被MITTechnologyReview評(píng)為“2015年度十大突破技術(shù)”。BCCResearch的報(bào)告指出，2020年，液體活檢市場(chǎng)將達(dá)220億美元。
液體活檢熱度攀升
近日，在“2016中國(guó)體外診斷試劑創(chuàng)新論壇——液態(tài)活檢聚焦”上，江蘇省人民醫(yī)院檢驗(yàn)學(xué)部主任潘世揚(yáng)發(fā)表了題為《腫瘤液體活檢技術(shù)的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀和未來(lái)》的演講。
江蘇省人民醫(yī)院檢驗(yàn)學(xué)部主任潘世揚(yáng)
據(jù)介紹，液體活檢主要是以患者的體液作為腫瘤活檢的樣本，捕捉和檢測(cè)的對(duì)象包括體液中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）、循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）和外泌體（Exosome）。與傳統(tǒng)的組織活檢相比，液體活檢具有速度快、樣本容易獲取、痛苦/風(fēng)險(xiǎn)小等特點(diǎn)。
近年來(lái)，液體活檢研究熱度不斷攀升。據(jù)統(tǒng)計(jì)，1965年至2016年4月，Pubmed上檢索的CTC相關(guān)文獻(xiàn)累計(jì)有17775篇，ctDNA相關(guān)文獻(xiàn)累計(jì)有3238篇。近20年內(nèi)，CTC研究呈爆發(fā)性增長(zhǎng)，ctDNA研究也在快速增長(zhǎng)中。
CTC鑒定技術(shù)一覽
目前常見的CTC鑒定技術(shù)基于的原理包括3個(gè)：利用細(xì)胞表面特異性標(biāo)記、利用細(xì)胞特異性形態(tài)以及利用細(xì)胞遺傳基因信息。下圖展示了各國(guó)的公司基于不同原理開發(fā)的檢測(cè)技術(shù)。
當(dāng)然，科學(xué)家們也在開發(fā)其它的捕獲技術(shù)。報(bào)告中，潘世揚(yáng)主任提到了去年4月發(fā)表在PNAS（論文題目：Acousticseparationofcirculatingtumorcells）上的一項(xiàng)研究。來(lái)自MIT的一個(gè)科學(xué)家小組開發(fā)出分離CTC的一種新方法，即利用聲波將它們與血細(xì)胞分離。
在實(shí)驗(yàn)室中，研究人員用含有癌細(xì)胞、白細(xì)胞的混合物組成的樣本（每10萬(wàn)個(gè)白細(xì)胞含有1個(gè)癌細(xì)胞）檢測(cè)了這款新的聲學(xué)裝置。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，他們分離出了至少83%的癌細(xì)胞。在檢測(cè)三名乳腺癌患者的血液樣本時(shí)，該設(shè)備也表現(xiàn)良好，分別分離出了1、8和59個(gè)腫瘤細(xì)胞。其中，第一名患者對(duì)治療響應(yīng)良好，因此幾乎不含循環(huán)腫瘤細(xì)胞。
他們的檢測(cè)結(jié)果與一種商業(yè)化分離癌細(xì)胞的設(shè)備相似，但已經(jīng)商業(yè)化的設(shè)備會(huì)損傷細(xì)胞，無(wú)法進(jìn)行進(jìn)一步的研究。相比之下，聲學(xué)技術(shù)非常溫和，不需要磁珠、抗體或其它分子標(biāo)記，適合進(jìn)一步的分析。目前，研究小組正在推進(jìn)這一技術(shù)向臨床轉(zhuǎn)化。
多方向臨床應(yīng)用 液體活檢的潛在應(yīng)用領(lǐng)域包括腫瘤早期體外診斷與篩查、臨床療效的快速評(píng)價(jià)、個(gè)體化治療（篩藥和耐藥檢測(cè)）、腫瘤患者術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移檢測(cè)、新腫瘤藥物的開發(fā)以及腫瘤轉(zhuǎn)移的研究等。
在早期診斷方面，在使用高靈敏度檢測(cè)ctDNA突變方法的前提下，ctDNA在早期腫瘤中的檢出率要高于CTC。此外，ctDNA還可以用于微小殘留病變的檢測(cè)、腫瘤的進(jìn)化和耐藥檢測(cè)、腫瘤基因分型的檢測(cè)，以及腫瘤的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。
潘世揚(yáng)主任表示，液體活檢正處于剛剛起步階段，很多技術(shù)還并不成熟。但這些新技術(shù)的出現(xiàn)有望幫助打破原有的腫瘤診療誤區(qū)，如忽視腫瘤轉(zhuǎn)移環(huán)節(jié)、腫瘤異質(zhì)性等。
對(duì)于異質(zhì)性很強(qiáng)的腫瘤，相比組織單一取材，CTC更全面的代表了腫瘤組織的異質(zhì)性，更適合于評(píng)估腫瘤的分子特征以及檢測(cè)腫瘤進(jìn)展。
然而，CTC的簡(jiǎn)單計(jì)數(shù)并不能反映腫瘤細(xì)胞內(nèi)在的生物學(xué)特性。然而，正是這種特性決定了不同腫瘤細(xì)胞對(duì)治療具有不同的反應(yīng)。因此，對(duì)CTC細(xì)胞的分子特性（例如藥物靶向基因的表達(dá)、藥物耐受相關(guān)基因突變的檢測(cè)）的精細(xì)刻畫將有利于充分發(fā)掘CTC在指導(dǎo)臨床治療的價(jià)值。
生物標(biāo)志物至關(guān)重要
需要注意的是，傳統(tǒng)的活檢一般是利用顯微鏡觀察對(duì)病變組織及細(xì)胞形態(tài)的進(jìn)行分析和識(shí)別，不需要液體活檢中用到的生物標(biāo)志物。小編注意到，去年8月，GEN網(wǎng)站發(fā)布的一份液體活檢報(bào)告指出，不同種類的生物標(biāo)志物正驅(qū)動(dòng)著液體活檢領(lǐng)域的發(fā)展。這些生物標(biāo)志物也處于一場(chǎng)誰(shuí)將領(lǐng)導(dǎo)液體活檢的競(jìng)爭(zhēng)中。
潘世揚(yáng)主任表示，疾病的預(yù)測(cè)、預(yù)防及精準(zhǔn)醫(yī)療需要找準(zhǔn)檢測(cè)的靶子，瞄準(zhǔn)靶心。腫瘤標(biāo)志物從研究到臨床應(yīng)用的轉(zhuǎn)化非常困難。從源頭標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)，到臨床應(yīng)用需要經(jīng)過(guò)很多步驟，過(guò)程可長(zhǎng)達(dá)50年。就肺癌而言，包括目前新發(fā)現(xiàn)的一些標(biāo)志物，也只有幾個(gè)蛋白可用于臨床。
一種生物標(biāo)志物要想真正應(yīng)用到臨床中需要經(jīng)歷發(fā)現(xiàn)、確認(rèn)、評(píng)估、檢測(cè)方法學(xué)優(yōu)化、臨床驗(yàn)證以及上市這一系列的過(guò)程。潘世揚(yáng)主任強(qiáng)調(diào)，開發(fā)潛在標(biāo)志物需要特別考慮性價(jià)比問(wèn)題。如果相關(guān)技術(shù)的費(fèi)用過(guò)高，患者可能無(wú)法承擔(dān)。
未來(lái)三大發(fā)展趨勢(shì) 報(bào)告的最后，他總結(jié)了液體活檢技術(shù)未來(lái)的三大發(fā)展趨勢(shì)：
1）CTC和ctDNA聯(lián)合檢測(cè)：增加液體活檢的敏感性和特異性，以適應(yīng)未來(lái)腫瘤患者各個(gè)不同時(shí)期的診療需要；
2）檢測(cè)技術(shù)的自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化：使實(shí)驗(yàn)操作更加快速準(zhǔn)確，適應(yīng)當(dāng)前臨床醫(yī)學(xué)不斷發(fā)展的需求；
3）檢驗(yàn)科和病理科密切合作，共同開展液體檢測(cè)。
